미생물은 반드시 환부에 존재해야 한다.

순수 배양한 병원균을 접종하여 다른 병이 발생되어야 한다.

발병한 피해부에서 접종에 사용한 미생물과 동일한 성질을 가진 미생물이 재분리되어야 한다.

미생물은 배지 상에서 순수배양되어야한다.