한 무리의 실험동물 50%를 사망시키는 독성물질의 양이다.

실험방법은 검체의 투여량을 고농도로부터 순차적으로 저농도까지 투여한다.

독성물질의 경우 동물체중 1 kg에 대한 독물량(mg)으로 나타내며 동물의 종류나 독물경로도 같이 표기한다.

LD₅₀의 값이 클수록 안전성은 높아진다.