발색 최적 pH범위는 pH 5∼9이지만, 이 방법에서는 탄산염완충액을 가하여 pH 7.8로 조절한다.

클로라민 T용액(1%)의 첨가량이 0.3mg이상으로 되면 발색이 저하된다.

발색정도는 온도가 높아지게 되면 빨라지며 퇴색은 영향을 받지 않는다.

발색시의 온도를 25± 1℃로 하며 30분 이내에서 최고로 발색하고 발색 후 6시간 정도는 안정하다.